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蛋白-蛋白相互作用是蛋白质结构与功能研究中最重要的方面之一。GST pull-down将靶蛋白与GST融合表达,并将蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白。
诱饵蛋白"和"捕获蛋白"均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。此方法简单易行,操作方便。
金开瑞现提供的GST pull down检测技术服务,使用特异性二抗进行检测,能有效避免抗体重链对结果的信号干扰,显著提升检测效果。
验证两种蛋白质间相互作用——
验证目的蛋白与细胞裂解物蛋白互作——
构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白(也可选择由金开瑞构建),或者含有诱饵蛋白的细胞裂解上清或者其它;检测用一抗(也可选择由金开瑞提供)。
样品需-20℃冻存,冰袋运输。
提供完整的实验报告, SDS-PAGE 以及western blot结果。
服务项目 | 服务内容 | 服务周期(工作日) |
---|---|---|
GST pull down | In vitro GST pull down (原核表达靶蛋白与诱饵蛋白) | 5周 |
In vitro GST pull down (原核表达靶蛋白和细胞裂解上清) | 4-5周 | |
In vitro GST pull down (真核表达靶蛋白和细胞裂解上清) | 8-12周 | |
WB检测 | 1周 |
1. 邮件订购:请点击此处下载“GST pull down项目信息咨询单”,详细填写信息后,发送至邮箱zonghe@genecreate.com。
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