研究方案
龙八国际app手机版下载_龙八国际app客户端下载_龙8国际下载:分子互作研究
miRNA可以与mRNA结合调节体内基因的表达,通过影响蛋白的表达、修饰、酶活性等来调节生命活动的进行。lncRNA作为体内的ceRNA,可以与miRNA结合起到调节基因表达的作用。研究lncRNA与miRNA的相互作用对于研究生命具有重要的意义。通过MS2-RIP和灵敏度更高的双荧光素酶技术,来研究lncRNA和miRNA的相互作用。
龙八国际app手机版下载_龙八国际app客户端下载_龙8国际下载,锦-心-似-玉-徐-令-宜-罗-十-一-娘-圆-房华-为-nova8vs荣-耀-v40在-人-行-要-会-写-吗红-领-巾-学-党-史-树-初-心
老-葡-京-国-际-网-站,特-斯-拉-正-在-行-驶-中海-洋-气-候-周-天-气eva剧-场-版-怎-么-了江-苏-构-建-多-层-次-枢-纽-城-市-群
豪-彩-国-际-线-长,失-业-金-保-险-费真-我-gt支-持-5g最-新-版-大-学-专-业意-大-利-新-冠-肺-炎-疫-情-有-多-少-例
MS2-RIP技术主要是应用针对GFP抗体的Protein G磁珠把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA 进行q-PCR验证或者测序分析。
技术流程
案例展示

图. MS2- RIP实验原理图(表达Lnc-A的质粒富集miRNA1miRNA2的效率比不表达Lnc-A的MS2组明显提高。通过对照,说明MS2-A可以与miRNA1和miRNA2相互结合)
双荧光素酶报告基因通常是一个报告基因作为内对照,使另一个报告基因的检测均一化。金开瑞应用Promega 公司的双荧光素酶报告基因检测(DLR)系统,提供DLR 检测服务。
技术流程
案例展示

图. 双荧光素酶和RIP验证lncRNA可以与miR-26a结合
(引自C Cao, Zhang T, Zhang D. et al.The long non-coding RNA, SNHG6-003, functions as a competing endogenous RNA to promote the progression of hepatocellular carcinoma. Oncogene. 2017 Feb 23;36(8):1112-1122. )